Blog

Mar 14, 2023

Anti

Informes científicos volumen 13,

Scientific Reports volumen 13, Número de artículo: 8667 (2023) Citar este artículo

412 Accesos

1 Altmetric

Detalles de métricas

La infección por Toxoplasma gondii (T. gondii) continúa aumentando a nivel mundial en humanos y animales con grandes desafíos socioeconómicos y de salud pública. Los medicamentos actuales utilizados contra la infección por T. gondii tienen una eficacia, seguridad y asequibilidad limitadas. Esta investigación se llevó a cabo para evaluar el mayor efecto del extracto de hongos sobre el crecimiento de taquizoítos de T. gondii in vitro y posiblemente descifrar su mecanismo de acción. Además, evaluamos el efecto del extracto sobre la viabilidad de los fibroblastos del prepucio humano. Los extractos de metanol del hongo cola de pavo (TT) se probaron contra el crecimiento de taquizoítos de T. gondii usando una cepa RH-RFP tipo I que expresa proteína fluorescente roja en todo el cultivo de una manera dependiente de la dosis usando un lector de placas fluorescentes. De manera similar, probamos el efecto del extracto sobre la viabilidad de la célula huésped. Observamos que el extracto de TT inhibió el crecimiento de taquizoítos con una concentración inhibitoria mínima del 50 % (IC50s), IC50 = 5,98 ± 1,22 µg/mL, y una concentración citotóxica del 50 % (CC50s), CC50 ≥ 100 µg/mL. Se descubrió que el extracto de TT inducía una fuerte producción de superóxido de mitocondrias y especies reactivas de oxígeno y alteraba el potencial de membrana de las mitocondrias en los taquizoítos de T. gondii. Además, la microscopía electrónica de barrido mostró que el extracto de TT y la pirimetamina (PY) causaron una deformación morfológica de los taquizoítos in vitro. En conclusión, el extracto de metanol TT compuesto por fitoesteroles, esfingolípidos bioactivos, péptidos, ácidos fenólicos y lactonas podría ser una fuente prometedora de nuevos compuestos para el desarrollo futuro de fármacos anti-Toxoplasma gondii. Los extractos no fueron citotóxicos, incluso en concentraciones más altas.

La toxoplasmosis es una enfermedad ocular, congénita y neuroparasitaria causada por un protozoo unicelular, T. gondii. La infección por T. gondii es globalmente prevalente en humanos y animales1,2,3. T. gondii se considera un parásito olvidado, sin embargo, su infección en humanos y animales contribuye a problemas de salud pública, veterinarios y socioeconómicos a nivel mundial1,4. Según los CDC, el parásito puede causar complicaciones que amenazan la salud en mujeres embarazadas, sus fetos y personas con inmunidad comprometida4. Solo en los EE. UU., se ha estimado que más de 40 millones de personas pueden haber sido infectadas con este exitoso parásito zoonótico4.

Un estudio reciente ha demostrado que los felinos, la familia de los felinos, tienen una tasa de seroprevalencia que oscila entre el 35 y el 75 % a nivel mundial5. El problema más preocupante asociado con este parásito es su presencia cada vez mayor en la carne y los productos de animales y aves ligados a los alimentos1. Los fármacos más recomendados para el tratamiento de la forma de replicación rápida (taquizoítos) han sido los antifolatos (es decir, pirimetamina y sulfadiazina)4,6,7. Sin embargo, se ha informado que esta combinación y otras tienen varios problemas de toxicidad, y el fracaso del tratamiento con la etapa de taquizoítos no elimina la etapa de crecimiento lento (bradizoítos)6,7,8 y son costosos para las comunidades pobres9. Como resultado del aumento de estos numerosos desafíos y el aumento de las tasas de seroprevalencia tanto en animales domésticos como salvajes, aves, y la creciente aparición de enfermedades que podrían debilitar la inmunidad en humanos, es necesario encontrar nuevos nutracéuticos o compuestos para un mayor desarrollo contra parásitos. la infección se vuelve cada vez más importante y necesaria.

Se ha informado que los extractos a base de plantas, algas y hongos y sus metabolitos tienen fuentes prometedoras de compuestos antiparasitarios que podrían desarrollarse aún más como agentes antiparasitarios efectivos y seguros10,11,12,13,14,15,16, 17

El hongo Trametes versicolor, que se clasifica como poliporo, tiene enormes usos medicinales a nivel mundial18. Además de sus propiedades medicinales, es rica en proteínas esenciales, polisacáridos, esteroles y sus derivados, esfingolípidos bioactivos, triterpenoides y péptidos, y tiene altas propiedades antioxidantes15,16,19,20,21,22,23. Más específicamente, se ha informado que T. versicolor tiene propiedades antiparasitarias (por ejemplo, contra Leishmania spp)15,16. Otros también han informado de sus amplias propiedades antitumorales24,25. Sin embargo, no existía evidencia sobre el efecto de este hongo sobre el crecimiento de taquizoítos de T. gondii in vitro y su mecanismo de acción. El único estudio conocido en el campo sobre hongos (hongos) anti-T. gondii es el estudio con el hongo Trichoderma stromaticum26. En este estudio, los investigadores observaron una disminución en la replicación de T. gondii in vitro y una mejora de la toxoplasmosis experimental in vivo26. Con base en nuestros estudios previos y otros sobre las propiedades químicas, las propiedades nutricionales y para la salud y la actividad anti-Leishmania spp11,15,23,27 de este hongo (TT), atrajo nuestro interés para investigar su efecto anti-T. gondii para descifrar si podría convertirse en un nutracéutico seguro y eficaz para el manejo de parásitos zoonóticos, especialmente en países en desarrollo, donde las seroprevalencias de estos parásitos son muy altas y el hongo se encuentra en abundancia.

En este estudio, investigamos el efecto de la actividad inhibitoria del extracto de hongo cola de pavo en los taquizoítos de T. gondii y evaluamos sus efectos citotóxicos. Además, presentamos un posible mecanismo de acción preliminar de la actividad inhibidora del extracto de hongos contra T. gondii in vitro.

El espécimen de hongo [Trametes versicolor (Cola de pavo)] utilizado en este estudio se recolectó en Tuskegee en 2018/2019 y fue identificado por el Dr. Frederick Lafayette, micólogo afiliado a la Universidad de Tuskegee, Tuskegee, AL, EE. UU. El espécimen del hongo se encuentra en el laboratorio del Dr. Daniel Abugri en la Universidad Estatal de Alabama, Montgomery, Alabama, EE. UU. El hongo se extrajo con metanol a 37 °C durante 3 días y se filtró con papel filtro Whatman número 1. Los residuos se reextrajeron tres veces más con 150 mL de metanol. Todos los filtrados se juntaron y se secaron utilizando un evaporador de nitrógeno/campana extractora, dando aproximadamente 0,5 g de extracto crudo. El extracto crudo se disolvió en DMSO a razón de 2,54 mg/mL y se almacenó a -20 °C hasta los estudios antiparasitarios. El porcentaje de DMSO en cada dilución de extracto para los ensayos biológicos fue del 0,1%.

Human Telomerase Reverse Transcriptase (hTERT) inmortalizó células de fibroblastos de prepucio humano (HFF) obtenidas del Dr. Silva NJ. Moreno (Universidad de Georgia, Athens, GA) se mantuvo utilizando medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) sin rojo fenol suplementado con suero fetal bovino (FBS) al 5 % (v/v), L-glutamina 200 nM y suero bovino fetal al 1 % (v/v). v) penicilina-estreptomicina obtenida de (Life Technologies, EE. UU.) e incubada a 37 °C con 5 % de CO2 y 95 % de aire atmosférico. T. gondii (cepa tipo I, RH-RFP que expresa proteína roja fluorescente en cultivo o RH-W, tipo salvaje proporcionado amablemente por la Dra. Silvia NJ Moreno, Universidad de Georgia, Athens, GA) fue el tipo de cepa utilizado en todos los experimentos Los taquizoítos de T. gondii se recogieron pasándolos a través de una aguja de calibre 27 seguido de filtración con un filtro de 3 µm.

Se sembraron 6 × 104 células hTERT/200 μL/pocillo en placas planas de 96 pocillos de fondo negro y se incubaron a 37 °C con CO2 al 5 % durante 24 h28. Las células muertas se eliminaron lavando tres veces con solución salina tamponada con fosfato 1X (1XPBS). Los pocillos se rellenaron con 100 μL de medio y 100 μL de extracto TT preparado en concentraciones a partir de 0, 0,78, 1,53, 3,06, 6,125, 12,5, 25 y 50 μg/mL. Se utilizó PY (Santa Cruz Biotechnology Inc., Dallas, Texas, EE. UU.) como control estándar con rangos de concentraciones equivalentes probados en μg/mL. La placa se incubó a 37 °C con 5% de CO2 durante 72 h. Luego, se agregaron 10 μL de colorante Alamar Blue (Abcam, Waltham, MA, EE. UU.) a los pozos y la placa se envolvió en papel de aluminio y se incubó en condiciones de cultivo estándar durante una hora. A continuación, se retiraron las placas de la incubadora y se midieron las intensidades de fluorescencia de cada pocillo a una longitud de onda de excitación/emisión de 485/535 nm, respectivamente. El porcentaje de viabilidad de la célula huésped se calculó comparando las intensidades de fluorescencia de las células tratadas con el blanco (medio con células sin fármaco) y los valores de CC50 se determinaron utilizando el software gráfico Pad Prism. Los experimentos se realizaron por cuádruple (n = 4) con tres pocillos independientes cada uno por experimento.

Para probar las propiedades antiparasitarias del extracto TT, sembramos 6 × 104 células hTERT/200 μL/pozo como se detalla en el ensayo de citotoxicidad. Después de 24 h de adherencia y confluencia de células, las células muertas que estaban presentes se eliminaron cuidadosamente lavando tres veces con PBS 1X. Se añadieron 6 × 104 taquizoítos/100 μL de la cepa T. gondii RH-RFP Tipo I a cada pocillo y se incubaron a 37 °C con CO2 al 5 % durante 3 h. Los parásitos extracelulares se eliminaron lavando con PBS 1X tres veces. Después del lavado, se agregaron 100 μL de extracto TT o PY en concentraciones que oscilaron entre 0 y 50 μg/mL para el extracto TT, y se usaron 0–50 μM para PY como control estándar. Los medios solo se usaron como control negativo. Las placas se incubaron a 37 °C con 5 % de CO2 y se leyeron a las 48 h con un lector de microplacas Tecan 200 F infinite con excitación/emisión ajustada a 560 nm/635 nm28, respectivamente. El porcentaje de crecimiento del parásito se calculó con las fórmulas: (Fluorescencia media del crecimiento parasitario control-fluorescencia del crecimiento parasitario tratado con fármacos/Fluorescencia media del crecimiento parasitario control) × 100. El porcentaje de inhibición se determinó utilizando el procedimiento informado por Huffman et al. al.28. Los experimentos se realizaron por cuádruple (n = 4) con tres pocillos independientes cada uno por experimento.

Se añadió 1 × 105 taquizoítos (100 μL) de la cepa de T. gondii RH-Wild tipo I a cada placa de 96 pocillos de fondo plano negro. Se usaron 1.56 y 50 μg/mL de extracto TT, 500 μM de peróxido de hidrógeno (H2O2) como control positivo y se agregaron medios solo como control negativo en cada pocillo con el mismo volumen de 100 μL de medios. La placa se incubó a 37 °C con CO2 al 5 % durante 30 min. Se agregaron 10 μL de 5 μM de reactivo Cell ROX™ Purple (N.º de catálogo Invitrogen C10443), se envolvió la placa con papel de aluminio y se incubó a 37 °C durante 30 min. Las intensidades de fluorescencia se midieron utilizando un lector de microplacas infinitas Tecan 200 F con excitación ajustada a 560 nm y emisión a 635 nm. Los experimentos se realizaron por triplicado (n = 3).

Se añadió 1 × 105 taquizoítos/100 μl de T. gondii RH-W (tipo salvaje) Tipo I a cada pocillo de las placas negras de 96 pocillos de fondo plano para evaluar la producción de superóxido mitocondrial por parásitos extracelulares. Luego agregamos 1.56 y 50 μg/mL de extracto TT, se usó H2O2 500 μM como control positivo y los medios solo como control negativo en los pocillos designados. Las placas se incubaron a 37 °C con CO2 al 5 % durante 3 h. Después de la incubación, se agregaron 50 μL de 5 μM de reactivo MitoSOX™ en cada pocillo, se envolvió con papel de aluminio y se incubó a 37 °C durante 30 min de acuerdo con el protocolo del indicador de superóxido mitocondrial rojo MitoSOX™ (M36008) proporcionado por Invitrogen, EE. UU. . Las intensidades de fluorescencia de los pocillos experimentales se leyeron utilizando un lector de microplacas infinitas Tecan 200 F con excitación fijada a 485 nm y emisión a 535 nm. Los experimentos se realizaron por triplicado (n = 3).

Para determinar si la alta producción de superóxido exhibida por el extracto TT tuvo algún efecto sobre el potencial de la membrana mitocondrial de T. gondii, utilizamos el ensayo de sonda catiónica JC-1 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, CA, EE. UU.). Aquí, se sembraron 1 × 105 taquizoítos recién purificados de T. gondii RH de tipo salvaje I cepa/50 μL de medio en una placa de 96 pocillos de fondo negro plano (Costar, Corning Inc., NY, EE. UU.). Luego, 50 μL de solución que contiene 1.56 y 50 μg/mL de TT como fármaco experimental, 50 μM de carbonilo cianuro m-clorofenilhidrazona (CCCP, de Alfa Aesar, Haverhill, MA, EE. UU.) como control positivo y tampón de ensayo (AB) como control negativo se añadieron a los pocillos seguido de incubación durante 8 h a 37 °C con 5 % de CO228,29,30,31. Se agregaron 10 μL de JC-1 a los pocillos y las placas de reacción se cubrieron con papel de aluminio y se incubaron durante 45 min. Luego, seguido de una centrifugación a 12 °C durante 2000 rpm durante 5 min, se eliminó el sobrenadante y se agregaron 100 μL de tampón de ensayo (solución salina balanceada de Hanks (HBSS) sin rojo de fenol) a cada pocillo, seguido de una centrifugación al mismo tiempo. condición y eliminación del sobrenadante. A continuación, se agregaron 100 μL de tampón de ensayo para suspender los parásitos en la solución. La fluorescencia de los parásitos se leyó a 560/635 nm para los agregados JC-1 J (590 nm) y a 485/535 nm para los monómeros JC-1 J (529 nm) utilizando un lector de microplacas infinitas Tecan 200 F. La relación entre los valores de fluorescencia de los agregados J y los valores de fluorescencia de los monómeros se calculó utilizando las siguientes fórmulas: Unidades relativas de fluorescencia (RFU) de agregados J (rojo)/RFU de monómeros J (verde). Se tomaron imágenes para cada grupo de tratamiento utilizando un microscopio de fluorescencia EVOS FL (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA, EE. UU.). Los experimentos se realizaron por triplicado (n = 3) y se crearon gráficos.

Se preparó una monocapa confluente de células Vero (1 × 105) por pocillo de una placa de 6 pocillos (con cubreobjetos en los pocillos). Luego se agregaron a cada pocillo 1 × 105 taquizoítos de T. gondii RH-W, junto con 1,56 y 50 μg/mL de TT y 0,38 y 12,4 μg/mL de PY. La placa se incubó a 37 °C con 5% de CO2 durante 48 h. A continuación, las células se lavaron con PBS 1X (3 veces) y se trataron con glutaraldehído al 2,5 % y se mantuvieron a 4 °C durante la noche. A continuación, las células Vero que contenían taquizoítos se lavaron con PBS 1X (3 veces) y se añadió tetróxido de osmio al 1 % y se mantuvieron en la oscuridad durante 1,5 h. Luego, las células se lavaron con PBS 1X (3 veces), se deshidrataron en una serie graduada de etanol (p. ej., 50 %, 70 %, 90 %, 100 %), se transfirieron a acetona al 100 % y luego se secaron al aire dentro de una campana extractora32. Después de la deshidratación, las muestras se recubrieron con oro y se tomaron imágenes con un microscopio electrónico de barrido Zeiss EVO 50 (Carl Zeiss Microscopy, Thornwood, NY, EE. UU.).

El análisis se realizó en un sistema Vanquish UHPLC (Thermo Fisher, EE. UU.) acoplado con un espectrómetro de masas cuadrupolo orbitrap (Orbitrap Exploris 120, Thermo) con ionización por electropulverización (H-ESI) en modo positivo y negativo utilizando el software Xcalibur (V4.4.16.14). ). Se inyectaron 10 μL del extracto TT (2,54 mg/mL) en una columna C18 (ACQUITY UPLC® BEH C18, 1,7 µm, 2,1 × 50 mm, Waters) con un caudal de 200 μL/min de fase móvil de solución A ( 0,1 % de ácido fórmico en 50 % de agua, 50 % de metanol) y solución B (50 % de acetonitrilo y 50 % de isopropanol con 0,05 % de ácido fórmico) comenzando con 30 % de B hasta 50 % de B en 1 min seguido de un gradiente lineal hasta 100 % de B en 13 min, se mantuvo durante 3 min, luego se volvió a 30%B y 3 min de reequilibrio (tiempo total de 21 min). El voltaje de pulverización se fijó en 3,5 kV en modo positivo y 3,0 kV en modo negativo. El extracto metanólico de TT se inyectó dos veces, una para cada modo. El gas envolvente se fijó en 30, el gas auxiliar en 20 y el gas de barrido en 0 (todas las unidades arbitrarias) con la temperatura del vaporizador y la temperatura del tubo de transferencia de iones a 300 y 350 °C, respectivamente. La resolución orbitrap se estableció en 120 000 para MS y 15 000 para DDA MS/MS con 4 escaneos dependientes con un umbral de intensidad de 20 000, exclusión dinámica automática y una lista de masa de exclusión dirigida basada en inyecciones en blanco. EASY-IC estaba activado para la exploración de MS con un rango de 115–1000 Da. La energía de colisión se normalizó y se escalonó a 10, 40 y 100 con el tiempo máximo de inyección establecido en automático. El análisis fitoquímico se realizó en el Centro de Investigación de Espectrometría de Masas de la Universidad de Auburn, Auburn, Alabama.

Las muestras se procesaron con Compound Discoverer 3.2 usando los productos naturales y el flujo de trabajo de metabolómica no dirigido con la base de datos de carotenoides, la base de datos de metaboloma humano y LipidMAPS.

Los IC50 y CC50 se obtuvieron usando el software Graph Pad Prism versión 9.4.1. La comparación de medias se realizó mediante la prueba de comparación múltiple de Tukey con el valor alfa establecido en 0,05.

En este estudio, reportamos por primera vez el anti-T. gondii actividad inhibitoria del extracto de hongo cola de pavo (Trametes versicolor) in vitro. Se calculó que la IC50 y la CC50 del extracto TT eran IC50 = 5,98 ± 1,22 µg/mL y CC50 ≥ 100 µg/mL, respectivamente. Para el control de calidad de nuestro estudio, utilizamos pirimetamina (PY) como control estándar que dio un IC50 = 4,98 ± 0,49 µM (1,22 ± 0,12 µg/mL) y CC50 ≥ 50 µM (12,44 µg/mL) (Tabla 1).

Las curvas de inhibición de T. gondii para las 48 h se presentan en la Fig. 1 complementaria.

Para confirmar que nuestros resultados de inhibición de parásitos efectivos obtenidos se debieron únicamente a los metabolitos secundarios encontrados en el extracto de TT, pero no como resultado de los efectos citopáticos sobre el crecimiento de taquizoítos, realizamos una prueba de viabilidad de la célula huésped utilizando las mismas concentraciones utilizadas en el ensayo de inhibición parasitaria. . Los resultados se presentan en la Tabla 1. Curiosamente, las concentraciones de extracto TT y PY analizadas no fueron citotóxicas para las células huésped a las concentraciones IC50 obtenidas para la inhibición de taquizoítos de T. gondii a las 48 h (Tabla 1).

Las mitocondrias son orgánulos importantes para el suministro de energía de T. gondii. En este estudio, se descubrió que el extracto de TT induce una disminución en el potencial de la membrana mitocondrial (Fig. 1), lo que implica que esto podría haber afectado la supervivencia y la replicación del parásito, que dependen de la energía. Hubo diferencias estadísticas entre el control negativo (solo tampón de ensayo) frente a 1,56 µg/ml de extracto TT (p < 0,0001), solo el tampón de ensayo frente a 50 µg/ml de extracto TT (p = 0,0038) y solo el tampón de ensayo frente al control positivo ( CCCP) (p < 0,0001). Además, hubo una diferencia estadística entre la interrupción del potencial de la membrana mitocondrial usando el CCCP (control positivo) y las concentraciones seleccionadas de TT probadas con p < 0.0001 (Fig. 1).

Proporción de fluorescencia de agregado JC-1 (560/635 nm) a monómero JC-1 (485/535 nm) en extracto TT, tampón de ensayo (control negativo) y cianuro de carbonilo m-clorofenil hidrazona (CCCP) como control positivo, **, **** indica diferencias significativas entre las concentraciones probadas y los controles utilizados con p < 0,01 y p < 0,0001, respectivamente.

Se descubrió que el extracto de TT causa la producción de superóxido mitocondrial en T. gondii in vitro (Fig. 2).

Efecto del extracto de hongo cola de pavo sobre la producción de superóxido mitocondrial de taquizoítos de T. gondii. ** indicar significación con p < 0,01. El lector de placas utilizó el espectro de excitación/emisión de 485/535 nm. ns ninguna diferencia significativa.

Significativamente, el extracto de hongos provocó la producción de superóxido de mitocondrias de taquizoítos con una fuerte diferencia estadística entre el control negativo (solo medios) p < 0,01 y el control positivo (H2O2) p < 0,0001.

Se encontró que el extracto metanólico de TT de 50 μg/mL causaba una mayor producción de especies reactivas de oxígeno en taquizoítos en comparación con los medios (control negativo) in vitro (Fig. 3) con p < 0,0001. Del mismo modo, la producción de ROS del control positivo (500 μM de H2O2) fue estadísticamente diferente en comparación con la generación de ROS de taquizoítos tratados con el medio (control negativo) (p < 0,0001). Hubo diferencia significativa entre 1,56 μg/mL y la media (control negativo) con p < 0,001. Por el contrario, las ROS producidas por las concentraciones más bajas y más altas del extracto de TT no dependían de la concentración.

Efecto del extracto de hongo cola de pavo sobre la producción de taquizoítos de T. gondii Especies reactivas de oxígeno (estrés oxidativo). *** y **** indican significación con p < 0,001 y p < 0,0001, respectivamente. ns ninguna diferencia significativa.

Se utilizó microscopía electrónica de barrido (SEM) para evaluar el efecto de TT y PY contra la morfología externa de los taquizoítos de T. gondii dentro de las células Vero. Los taquizoítos tratados estaban relativamente hinchados con ganchos (extensiones). El microporo (portal principal para la endocitosis normal), junto con su forma de media luna, se ha transformado con una forma inusualmente colapsada, perforada y desintegrada caracterizada por más agujeros, granos profundos y arrugas (Fig. 4A-H). Estos efectos fueron más pronunciados con concentraciones más altas de fármacos (50 μg/mL de TT y 12,44 μg/mL de PY) en comparación con las concentraciones más bajas de los medicamentos (1,56 μg/mL de TT y 0,38 μg/mL de PY) ( Figura 4A-H). Se encontró que los taquizoítos de control (no tratados) tenían una forma de media luna típica caracterizada por superficies exteriores lisas, regulares y completas (Fig. 4I-J). El patrón del resultado fue consistente con el resultado anterior con respecto al efecto del compuesto encontrado para inhibir T. gondii32.

Microfotografía de microscopía electrónica de barrido (SEM) de taquizoítos de T. gondii tratados con 1,56 μm (0,38 μg/ml) de PY (A, B), 50 μm (12,4 μg/ml) de PY (C, D), 1,56 μg/ml de TT (E, F), 50 μg/Ml de TT (G, H) y medio como control negativo (I, J). H gancho, C desintegración/colapso celular, M interrupción/perforaciones de la membrana; y las flechas rojas largas indican agujeros, la flecha blanca corta indica arrugas y la flecha roja corta indica hoyuelos. Las flechas verdes indican el tamaño regular, liso y con forma de cresta normal de los taquizoítos intracelulares típicos.

El análisis de espectrometría de masas reveló que el extracto de TT contenía fitoesteroles, ergostanos, lanostano, péptidos, ácidos grasos, triterpenoides, ácidos fenólicos, lípidos (fosfolípidos y esfingolípidos) y vitaminas (tabla 1).

Tradicionalmente, la toxoplasmosis se trata con inhibidores antifolatos (pirimetamina y sulfadiazina)4,6,7. Sin embargo, estos medicamentos y los medicamentos de segunda línea utilizados para el tratamiento tienen efectos secundarios clínicos graves en los pacientes y requieren dosis repetidas para la eliminación del parásito6,7,8. Además, estos fármacos no inhiben la forma de quiste tisular (bradizoíto) de T. gondii6,7,8. Estos inconvenientes de la medicación actual requerían el descubrimiento de nuevos compuestos que pudieran tratar las infecciones parasitarias en humanos y animales.

El estudio actual mostró que el extracto de TT inhibía eficazmente el crecimiento intracelular de T. gondii con efectos citotóxicos mínimos (Tabla 1). Nuestro valor de IC50 (5,98 µg/mL) fue consistente con algunos de los trabajos previos informados en la cepa tipo I de T. gondii (RH-YFP) utilizando extractos naturales y compuestos derivados de Sorghum bicolor con IC50 que oscilan entre 0,36 y 20,38 µg/mL21, 22 Sin embargo, nuestros resultados difieren de los experimentos in vitro reportados en Leishmania spp15,16. Las posibles razones del desacuerdo podrían deberse en parte al solvente de extracción, la composición del extracto TT y el tipo de protozoo probado.

El valor típico de IC50 para PY contra el crecimiento de taquizoítos de T. gondii está entre 0,0025 y 1,05 µg/mL28,33,34. Sin embargo, nuestro valor para PY fue alto. El alto valor de IC50 informado para la pirimetamina podría atribuirse a nuestra observación de la precipitación del fármaco en el medio de cultivo y podría haber causado una menor absorción por parte de las células de taquizoítos y, por lo tanto, impedido su potencia habitual contra el crecimiento del parásito. Cabe destacar en este estudio el índice de selectividad para el extracto TT que se calculó como > 17 y el del PY > 10. Esto implica que el extracto TT tendrá un amplio espectro para inhibir los taquizoítos de T. gondii in vitro en lugar de causar un efecto citotóxico. efecto como se ve en el fármaco primario (PY) reportado en la literatura12.

Curiosamente, se encontraron más compuestos en este trabajo actual en comparación con estudios previos que utilizaron n-hexano Leliebre-Lara et al.15, Leliebre-Lara et al.16. Las diferentes composiciones de las sustancias químicas observadas podrían atribuirse a parámetros estacionales y geográficos23. Además, en estudios previos de Leliebre-Lara et al.15,16, los extractos de n-hexano y etanol se fraccionaron, y esto podría haber eliminado algunos de estos componentes que se encuentran en nuestros datos de espectrometría de masas utilizando el extracto metanólico. Además, en nuestro trabajo anterior, descubrimos que el metanol era el mejor solvente para extraer grandes clases de metabolitos secundarios en hongos27.

Nuestros datos fitoquímicos confirmaron algunos de los estudios previos de la composición química de Trametes versicolor para incluir ergosterol, 5α, 8α-epidioxi-22E-ergosta-6, 22-dien-3β-ol y ácido trametenólico B en extractos TT obtenidos usando n-Hexano15, dieciséis.

Además, se ha informado que estos compuestos tienen actividades anti-Leishmania Leliebre-Lara et al.15, Leliebre-Lara et al.16. Por lo tanto, el anti-T. gondii observadas en el extracto TT podrían atribuirse a la presencia de lípidos bioactivos, ácidos grasos, péptidos, ácidos orgánicos, lactonas, ergosterol, 5α, 8α-epidioxi-22E-ergosta-6, 22-dien-3β-ol, ácido trametenólico B y compuestos fenólicos11,14,15,16. Se ha encontrado que los compuestos informados aquí perturban las membranas celulares, causan la detención del crecimiento en las células cancerosas, causan la interrupción del potencial de la membrana mitocondrial y la producción de radicales35,36.

Nuestros datos están respaldados por estudios previos que utilizaron análogos de esteroles sintéticos (22, 26-azo esterol y 24, 25-(R, S) epiminolanosterol) que mostraron una inhibición efectiva del crecimiento de taquizoítos de T. gondii in vitro37,38. Se sabe que estos esteroles inhiben la enzima de biosíntesis de esteroles 24(25)-esterol metiltransferasa (SMT) y se ha documentado que tienen una fuerte actividad inhibidora contra varios parásitos protozoarios, incluidos T. gondii, Trypanosoma cruzi, Leishmania spp37,38,39,40, 41 y Giardia lamblia42. Aunque T. gondii no contiene la ruta biosintética de esteroles43 a la que estos esteroles se dirigen en otros protozoos, se ha descubierto que causa distorsión de las mitocondrias, alteración de la membrana plasmática y, finalmente, la muerte de los parásitos38. La interrupción de la membrana mitocondrial observada por el ensayo JC-1 en este trabajo actual respaldó el informe anterior de los siguientes investigadores37,38, sobre la capacidad de los esteroles para alterar las mitocondrias de los parásitos, lo que lleva a una fosforilación oxidativa ineficaz y, finalmente, a la muerte de los parásitos. Significativamente, los datos SEM mostraron que los tratamientos TT y PY tenían defectos morfológicos en los taquizoítos intracelulares. Específicamente, se observó que los taquizoítos aumentaban de tamaño con ganchos (extensiones). Además, se observó que el microporo (portal principal para la endocitosis normal), junto con su forma de media luna normal, mostraba una forma inusualmente colapsada, perforada y desintegrada con más orificios, granos profundos y arrugas (Fig. 4A-H). Estas alteraciones fueron más pronunciadas a mayores concentraciones de fármacos (50 μg/mL de TT y 12,44 μg/mL de PY) en comparación con las concentraciones más bajas de los fármacos (1,56 μg/mL de TT y 0,38 μg/mL de PY) utilizados (Fig. 4A-H). Esta observación fue consistente con hallazgos previos sobre el efecto de cierto tipo de compuestos que inhiben el crecimiento de T. gondii32,37,38. Esta observación confirmó que la inducción del extracto TT de altas producciones de ROS y MitoSOX en taquizoítos condujo a una notable interrupción del potencial de la membrana mitocondrial (Figs. 1, 2, 3). Además, estos pueden haber causado las deformidades mitocondriales y la alteración estructural que se encuentran en los taquizoítos, que deben confirmarse con más experimentos.

Otros estudios también han demostrado que el peróxido de ergosterol (EP) que se identificó en nuestro estudio actual afecta el crecimiento de Entamoeba histolytica44; actividad anticancerígena24, antitripanosómica17, antileishmania spp15,16 y propiedades antivirales45,46. Se informó que el mecanismo de acción del antiviral EP (SARS-COVID) está asociado con la detención del crecimiento celular, lo que causa estrés oxidativo, unión, entrada y bloqueo de las etapas temprana y media después de la entrada45,46. Además, se ha informado que compuestos como el ácido 3-beta-Hydroxylanosta-8, 24-dien-21-oic [ácido trametenólico (TAB)] inhiben la proliferación de células cancerosas a través de la inhibición de la actividad H+/K+-ATPasa47. Esto implica que TAB también podría haber afectado la actividad H+/K+-ATPasa de T. gondii y posiblemente la señalización de Ca2+ que juega un papel crucial en la operación intracelular del ciclo lítico de T. gondii. Esta conjetura requiere más estudios. Además, en la literatura se ha informado que el ácido ursólico inhibe las células MCF-7, provocando la apoptosis de las células que conduce a la detención de G1 en la muerte de las células cancerosas48. La presencia de este compuesto en el extracto de TT también podría haber contribuido a la detención de la proliferación de parásitos, ROS y la inducción de MitoSOX que resultó en la muerte de los taquizoítos.

Otro compuesto que se descubrió en nuestro análisis de huellas dactilares del extracto TT fue la enniatina B, que se ha documentado que tiene actividad antibacteriana, antihelmíntica, antifúngica, herbicida e insecticida49. Este mecanismo de acción compuesto es a través de la inducción de una alta señalización de ROS, apoptosis, fragmentación del ADN y modulación de los canales de K+/Ca2+49.

Tomados en conjunto, todos los perfiles químicos únicos del extracto de TT y las actividades biológicas conocidas de algunos de estos compuestos descubiertos, se cree que TT tiene compuestos potentes que podrían explorarse más a fondo para validar su actividad individual y combinada, especialmente en aquellos compuestos conocidos por ejercen mecanismos biológicos de acción similares.

En resumen, nuestros resultados sobre la actividad inhibidora del extracto TT, sus efectos menos citotóxicos y el perfil químico mostraron que existen compuestos polares que podrían aislarse para su posterior detección y modificación química para estudios in vivo. Además, los posibles mecanismos de acción del extracto de TT contra la muerte de T. gondii fueron a través de una alta producción de ROS y MitoSOX, lo que resultó en un alto estrés parasitario, despolarización de la membrana mitocondrial, deformidades morfológicas y, finalmente, el colapso de las mitocondrias.

Los datos sin procesar utilizados para los gráficos están disponibles previa solicitud al autor correspondiente. La huella química del extracto TT se proporciona en la Tabla 1 complementaria.

Dubey, JP, Murata, FHA, Cerqueira-Cézar, CK, Kwok, OCH & Villena, I. Toxoplasmosis congénita en humanos: una actualización de la tasa mundial de infecciones congénitas. Parasitología 148, 1716 (2021).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Pappas, G., Roussos, N. & Falagas, ME Instantáneas de toxoplasmosis: Estado global de la seroprevalencia de Toxoplasma gondii e implicaciones para el embarazo y la toxoplasmosis congénita. En t. J. Parasitol. 39, 1385–1394 (2009).

Artículo PubMed Google Académico

Flegr, J., Prandota, J., Sovičková, M. & Israili, ZH Toxoplasmosis: una amenaza global. Correlación de la toxoplasmosis latente con la carga de enfermedad específica en un conjunto de 88 países. PLoS ONE 9, e90203 (2014).

Artículo ADS PubMed PubMed Central Google Scholar

CENTROS PARA EL CONTROL Y LA PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES. Parásitos-toxoplasmosis (infección por toxoplasma): Epidemiología y riesgo. Obtenido de CDC: Centros para la Prevención del Control de Enfermedades: https://www.cdc.gov/parasites/toxoplasmosis/epi.html. Consultado el 1 de mayo de 2023 (2023).

Montazeri, M. et al. Prevalencia serológica mundial de Toxoplasma gondii en félidos durante las últimas cinco décadas (1967-2017): revisión sistemática y metanálisis. Vectores de parásitos 13, 1–10 (2020).

Artículo CAS Google Académico

Shammaa, AM, Powell, TG & Benmerzouga, I. Resultados adversos asociados con el tratamiento de infecciones por Toxoplasma. ciencia Rep. 11, 1–8 (2021).

Artículo ANUNCIOS Google Académico

Shiojiri, D., Kinai, E., Teruya, K., Kikuchi, Y. & Oka, S. Combinación de clindamicina y azitromicina como tratamiento alternativo para la encefalitis por Toxoplasma gondii. emergente Infectar. Dis. 25, 841 (2019).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Secrieru, A., Costa, IC, O'Neill, PM & Cristiano, ML Agentes antipalúdicos como herramientas terapéuticas contra la toxoplasmosis—Un puente corto entre dos enfermedades distantes. Moléculas 25, 1574 (2020).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

McCarthy, M. El aumento de precios del 5000% de M. Drug pone de relieve los crecientes costos de los medicamentos en EE. UU. BMJ 351, h5114 (2015).

Artículo PubMed Google Académico

Mkhize, SS, Machaba, KE, Simelane, MB y Pooe, OJ Productos derivados de hongos como terapia alternativa contra la malaria: una revisión. Drug Dev Paludismo Enfoques novedosos Prev Treat. 235–249 (2022).

Abugri, DA et al. Hongos medicinales como nuevas fuentes para el desarrollo de nuevos fármacos antiparasitarios. En Hongos medicinales 251–273 (Springer, Singapur, 2019a).

Abugri, DA, Witola, WH, Russell, AE & Troy, RM Actividad in vitro de la interacción entre taxifolina (dihidroquercetina) y pirimetamina contra Toxoplasma gondii. Chem Biol Drug Des 91, 194–201 (2018).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Powers, JL, Zhang, X., Kim, CY, Abugri, DA & Witola, WH Actividad de extractos de algas verdes contra Toxoplasma gondii. Med Aromat Plants (Los Ángeles) 6, 2167–2412 (2017).

Google Académico

Abugri, D., McElhenney, WH y Willian, KR Perfiles de ácidos grasos en hongos medicinales silvestres y comestibles cultivados seleccionados en el sur de los Estados Unidos. Exp. J. Química alimentaria 2, 1–7 (2016).

Artículo Google Académico

Leliebre-Lara, V., García, M., Nogueiras, C. & Monzote, L. Análisis cualitativo de un extracto etanólico de Trametes versicolor y cribado biológico frente a Leishmania amazonensis. Emiratos J. Food Agric. 592–595 (2015).

Leliebre-Lara, V. et al. Actividad antileishmanial in vitro de esteroles de Trametes versicolor (Bres. Rivarden). Moléculas 21, 1045 (2016).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Ramos-Ligonio , A. , Lopez-Monteon , A. & Wheats , Á. Actividad tripanocida del peróxido de ergosterol de Pleurotus ostreatus. fitotera. Res. 26, 938–943 (2012).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Jordan, KZ Compuestos biológicamente activos de hongos Aphyllophorales (Polypore). J.Nat. Pinchar. 67, 300–310 (2004).

Artículo Google Académico

Valisolalao, J., Luu, B. & Ourisson, G. Esteroides citotóxicos de polyporus versicolor. Tetraedro 39, 2779–2785 (1983).

Artículo CAS Google Académico

Habibi, E., Sadat-Ebrahimi, SE, Mousazadeh, SA & Amanzadeh, Y. Investigación micoquímica del hongo medicinal cola de pavo Trametes versicolor (basidiomicetos superiores): una aplicación potencial de compuestos aislados en estudios farmacológicos documentados. En t. J.Med. Hongos 17, 255–265 (2015).

Artículo PubMed Google Académico

Abugri, DA, Jaynes, JM & Witola, WH Actividad anti-Toxoplasma de fracciones lipofílicas derivadas de Sorghum bicolor. Resolución BMC. Notas 12, 1–7 (2019).

Artículo CAS Google Académico

Abugri, DA, Witola, WH, Jaynes, JM & Toufic, N. Actividad in vitro de extractos de sorgo bicolor, 3-desoxiantocianidinas, contra Toxoplasma gondii. Exp. Parasitol. 164, 12–19 (2016).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Abugri, DA, McElhenney, WH y Willian, KR Comparación de métodos de transesterificación para el análisis de ácidos grasos en hongos superiores: aplicación a hongos. comida anal. Métodos 5, 1159–1166 (2012).

Artículo Google Académico

Tsukagoshi, S. et al. Cristina (PSK). Tratamiento del cáncer. Rev. Padre. 2, 131–155 (1984).

Artículo CAS Google Académico

Yunoki, S., Tanaka, N., Hizuta, A. & Orita, K. Mejora de la citotoxicidad antitumoral de los linfocitos hepáticos mediante la administración oral de PSK. En t. J. Immunopharmacol. 16, 123–130 (1994).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Nascimento, LAC et al. El extracto etanólico del hongo Trichoderma stromaticum disminuye la replicación de Toxoplasma gondii in vitro y mejora la toxoplasmosis experimental in vivo. actual Res. Microbio. ciencia 3, 100173 (2022).

CAS PubMed PubMed Central Google Académico

Abugri, DA & McElhenney, WH Extracción de fenólicos y flavonoides totales de hongos medicinales silvestres y cultivados comestibles afectados por diferentes solventes. J.Nat. Pinchar. Recurso Vegetal. 3, 37–42 (2013).

CAS Google Académico

Huffman, AM, Ayariga, JA, Napier, A., Robertson, BK y Abugri, DA Inhibición del crecimiento de Toxoplasma gondii por dihidroquinina y sus mecanismos de acción. Frente. Celúla. Infectar. Microbiol. 12, 852889 (2022).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Zhang, J., Si, H., Li, B., Zhou, X. & Zhang, J. Myrislignan exhibe actividades contra la cepa RH de Toxoplasma gondii al desencadenar una disfunción mitocondrial. Frente. Microbiol. 10, 2152 (2019).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Zhang, JL et al. Nueva vida para una vieja droga. Efectos in vitro e in vivo del fármaco antihelmíntico niclosamida contra la cepa RH de Toxoplasma gondii. En t. J. Parasitol. Drogas Resistencia a las drogas. 9, 27–34 (2019).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Zhang, JL et al. Licarin-B exhibe actividad contra la cepa RH de Toxoplasma gondii al dañar las mitocondrias y activar la autofagia. Frente. Celúla. desarrollo Biol. 9, 684393 (2021).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Liu, Y. et al. Efectos anti-Toxoplasma gondii de un nuevo péptido de araña XYP1 in vitro e in vivo. Biomedicinas 9, 934 (2021).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Sanford, AG y col. Nuevos quimiotipos inhibidores de Toxoplasma gondii. Parasitol. En t. 67, 107–111 (2018).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Abugri, DA & Witola, WH Interacción de apigenina-7-O-glucósido con pirimetamina contra el crecimiento de Toxoplasma gondii. J. parásito. Dis. 44, 221–229 (2020).

Artículo PubMed Google Académico

Bu, M. et al. Síntesis de conjugados de peróxido de ergosterol como sondas dirigidas a las mitocondrias para mejorar la actividad anticancerígena. Moléculas 24, 3307 (2019).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Kobori, M., Yoshida, M., Ohnishi-Kameyama, M., Takei, T. y Shinmoto, H. 5α, 8α-epidioxi-22E-ergosta-6, 9 (11), 22-trien-3β-ol de un hongo comestible suprime el crecimiento de la leucemia HL60 y las células de adenocarcinoma de colon HT29. Biol. Farmacia Toro. 29, 755–759 (2006).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Martins-Duarte, É. S. et al. Evaluación de tres nuevos azasteroles contra Toxoplasma gondii. Veterinario. Parasitol. 177, 157–161 (2011).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Dantas-Leite, L., Urbina, JA, de Souza, W. & Vommaro, RC Actividades selectivas anti-Toxoplasma gondii de azasteroles. En t. J. Antimicrobiano. Agentes 23, 620–626 (2004).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Rodrigues, JC, Attias, M., Rodriguez, C., Urbina, JA & Souza, WD Alteraciones bioquímicas y ultraestructurales inducidas por 22, 26-azasterol, un inhibidor de Δ24 (25)-esterol metiltransferasa, en formas de promastigote y amastigote de Leishmania amazonensis. Antimicrobiano Agentes Quimiotera. 46, 487–499 (2002).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Magaraci, F. et al. Azasteroles como inhibidores de la esterol 24-metiltransferasa en especies de Leishmania y Trypanosoma cruzi. J.Med. química 46, 4714–4727 (2003).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Gros, L. et al. Evaluación de azasteroles como antiparasitarios. J.Med. química 49, 6094–6103 (2006).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Maia, C. et al. Los azasteroles alteran la proliferación de Giardia lamblia e inducen la enquistación. Bioquímica Biografía. Res. común 363, 310–316 (2007).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Coppens, I., Sinai, AP & Joiner, KA Toxoplasma gondii aprovecha la endocitosis mediada por el receptor de lipoproteínas de baja densidad del huésped para la adquisición de colesterol. J. Cell Biol. 149, 167–180 (2000).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Meza-Menchaca, T., Suárez-Medellín, J., Del Ángel-Piña, C. & Trigos, Á. The amoebicidal effect of ergosterol peroxide isolated from Pleurotus ostreatus. Phytother. Res. 29, 1982–1986 (2015).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Duan, C., Liu, Y., Hao, Z. & Wang, J. El peróxido de ergosterol suprime la autofagia inducida por el deltacoronavirus porcino (PDCoV) para inhibir la replicación del virus a través de la vía de señalización p38. Veterinario. Microbiol. 257, 109068 (2021).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Duan, C. et al. Los efectos antivirales del peróxido de ergosterol en un modelo porcino de infección por deltacoronavirus porcino (PDCoV) implican la modulación de la apoptosis y la unión estrecha en el intestino delgado. Veterinario. Res. 52, 1–13 (2021).

Artículo Google Académico

Zhang, Q. et al. Las actividades inhibidoras de H+/K+-ATPasa del ácido trametenólico B de Trametes lactinea (Berk) Pat y sus efectos sobre las células de cáncer gástrico. Fitoterapia 89, 210–217 (2013).

Artículo CAS PubMed Google Académico

Martín-Cordero C, Reyes M, Ayuso MJ & Toro V. Triterpenoides citotóxicos de Erica andevalensis. Revista de Investigación Natural C. 56, 45–48 (2001).

Artículo Google Académico

Prosperini, A. et al. Una revisión de la micotoxina enniatina B. Front. Salud Pública 5, 304 (2017).

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Descargar referencias

El proyecto fue financiado por la Universidad Estatal de Alabama a través del Departamento de Ciencias Biológicas bajo la división de Microbiología Ph.D. programa. Estamos muy agradecidos con la Dra. Silvia NJ Moreno de la Universidad de Georgia, Athens, GA, y su equipo por proporcionar el T. gondii y las líneas de células huésped para el estudio. También estamos agradecidos con el Programa del Consejo STEM de Alabama por apoyar al Sr. Jonathan Catrett para realizar una pasantía en ASU.

Ogechi Destino Nwokeocha

Dirección actual: Programa de Doctorado en Odontología de la Facultad de Odontología (SOD), Meharry Medical College, Nashville, TN, EE. UU.

Estos autores contribuyeron por igual: Homa Nath Sharma y Jonathan Catrett.

Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias, Tecnología, Ingeniería y Matemáticas, Universidad Estatal de Alabama, Montgomery, AL, 36104, EE. UU.

Homa Nath Sharma, Audrey Napier, Boakai K. Robertson y Daniel A. Abugri

Doctorado en Microbiología Programa, Facultad de Ciencias, Tecnología, Ingeniería y Matemáticas, Universidad Estatal de Alabama, Montgomery, AL, 36104, EE. UU.

Homa Nath Sharma, Audrey Napier, Boakai K. Robertson y Daniel A. Abugri

Laboratorio de Etnomedicina, Parasitología y Descubrimiento de Drogas, Facultad de Ciencias, Tecnología, Ingeniería y Matemáticas, Universidad Estatal de Alabama, Montgomery, AL, 36104, EE. UU.

Homa Nath Sharma y Daniel A. Abugri

Enterprise State Community College, Enterprise, Alabama, EE. UU.

jonathan catrett

Departamento de Química, Facultad de Artes y Ciencias, Universidad de Tuskegee, Tuskegee, AL, 36088, EE. UU.

Ogechi Destino Nwokeocha

Departamento de Química y Bioquímica, Facultad de Ciencias y Matemáticas (COSAM), Universidad de Auburn, Auburn, AL, 36849, EE. UU.

melissa boersma

Instalación de Instrumentación de Investigación de la Universidad de Auburn, Facultad de Farmacia de Harrison, Universidad de Auburn, Auburn, AL, 36849, EE. UU.

Michael E Miller

También puede buscar este autor en PubMed Google Scholar

También puede buscar este autor en PubMed Google Scholar

También puede buscar este autor en PubMed Google Scholar

También puede buscar este autor en PubMed Google Scholar

También puede buscar este autor en PubMed Google Scholar

También puede buscar este autor en PubMed Google Scholar

También puede buscar este autor en PubMed Google Scholar

También puede buscar este autor en PubMed Google Scholar

DAA concibió la idea del estudio; DAA y OD recolectaron el hongo y OD extrajo los metabolitos bajo la supervisión de DAAHNS, OD y CJ realizaron los experimentos bajo la supervisión de DAAHNS, CJ y DAA procesaron los datos y construyeron los gráficos. MB y MEM realizaron la espectrometría de masas y el análisis de microscopía electrónica, respectivamente, con contribuciones técnicas a la identificación de compuestos y la identificación de deformaciones de parásitos. HNS escribió el manuscrito inicial; AN, BKR, MB y MEM proporcionaron los recursos, hicieron aportes y contribuyeron a la revisión del manuscrito para su envío. Todos los autores revisaron el manuscrito final y lo aprobaron para su envío.

Correspondencia a Daniel A. Abugri.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

Springer Nature se mantiene neutral con respecto a los reclamos jurisdiccionales en mapas publicados y afiliaciones institucionales.

Acceso abierto Este artículo tiene una licencia internacional Creative Commons Attribution 4.0, que permite el uso, el intercambio, la adaptación, la distribución y la reproducción en cualquier medio o formato, siempre que se otorgue el crédito correspondiente al autor o autores originales y a la fuente. proporcionar un enlace a la licencia Creative Commons e indicar si se realizaron cambios. Las imágenes u otro material de terceros en este artículo están incluidos en la licencia Creative Commons del artículo, a menos que se indique lo contrario en una línea de crédito al material. Si el material no está incluido en la licencia Creative Commons del artículo y su uso previsto no está permitido por la regulación legal o excede el uso permitido, deberá obtener el permiso directamente del titular de los derechos de autor. Para ver una copia de esta licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

Reimpresiones y permisos

Sharma, HN, Catrett, J., Nwokeocha, OD et al. Actividad anti-Toxoplasma gondii del extracto de hongo Trametes versicolor (Cola de pavo). Informe científico 13, 8667 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-35676-6

Descargar cita

Recibido: 02 febrero 2023

Aceptado: 19 de mayo de 2023

Publicado: 29 mayo 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-35676-6

Cualquier persona con la que compartas el siguiente enlace podrá leer este contenido:

Lo sentimos, un enlace para compartir no está disponible actualmente para este artículo.

Proporcionado por la iniciativa de intercambio de contenido Springer Nature SharedIt

Al enviar un comentario, acepta cumplir con nuestros Términos y Pautas de la comunidad. Si encuentra algo abusivo o que no cumple con nuestros términos o pautas, márquelo como inapropiado.